日韩男女激情视频在线观看-日韩男女性生活视频在线观看-日韩女同精品一区二-日韩女同在线二区三区-日韩女优在线观看-日韩欧国产精

服務中心
首頁 > 新聞中心 > 技術文章鏈脲佐菌素誘導糖尿病造模經驗分享

2015-07-07鏈脲佐菌素誘導糖尿病造模經驗分享

 STZ誘發糖尿病動物模型的原理 
       STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用,能誘發許多動物產生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造動物模型。國外有學者報道選用雄性大鼠制造模型的成模率明顯高于雌性大鼠。1型糖尿病與2型糖尿病動物模型的制備與STZ注射的劑量有關系:大劑量注射時,由于直接引起胰島β細胞的廣泛破壞,可造成1型糖尿病模型;而注射較少量STZ時,由于只是破壞一部分胰島β細胞的功能,造成外周組織對胰島素不敏感,同時給予高熱量飼料喂養,兩者結合便誘導出病理、生理改變都接近于人類2型糖尿病的動物模型。
造模前的喂養
      Ⅰ型糖尿病模型成模比較快,通常大鼠在普通飼料適應性喂養2周后即可開始造模
     Ⅱ型糖尿病模型:高脂飲食誘導加小劑量STZ。造模前喂以高脂(高糖)飼料,誘發出胰島素抵抗。
高脂(高糖)飼料
     高脂(高糖)飼料成分:其中含10%蔗糖,10%豬油,5%膽固醇
      由基礎鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按比搭配制作高脂高糖飼料:其比例為豬油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黃3 % ,基礎飼料59 %。
預實驗的重要性
      很重要。實驗時STZ的給藥量應參照預實驗的結果,盡量不要盲目按照文獻上或他人的給藥量來直接使用,鼠均重和空腹(低糖狀態)抗藥力、禁食時長、注射選時、以及之前飼養過程、測糖選時等都不相同,通過預實驗來確定符合自己實驗鼠的給藥計量,才是最科學的。
常用給藥劑量
    Ⅰ型糖尿病模型:大鼠劑量為70~65mg/Kg
    Ⅱ型糖尿病模型:高糖高脂喂養1~2個月的大鼠,STZ劑量在25~40mg/Kg
    或參考文獻(鼠均重不同,本劑量以200克均重為例)。
配置STZ溶液
     檸檬酸緩沖液的配制:
      檸 檬 酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液
     檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液
     鏈脲佐菌素配制液:用時將A、B液按一定比例混合(1:1.32也有按1:1的),PH計測定ph值,調節ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的檸檬酸緩沖液。
      注射時用檸檬酸緩沖液以1%的濃度溶解STZ,按空腹體重注射相應的STZ, 在30分鐘內注射完畢。注意: STZ容易失活, STZ快速稱取后仍要求干燥避光,推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙。
禁食和血糖的聯系
      禁食12小時以上(一般過夜禁食,不禁水)。禁食的時間越長,STZ對胰島β細胞的破壞力越明顯,即藥效越高。所以相對禁食時間延長,可以降低STZ的用量。
腹腔注射和尾部注射的區別
     尾部注射即靜脈注射,藥物利用率較高,同比腹腔注射,可以節省藥量,缺點是操作起來不如腹腔注射方便。
注射前操作步驟
      過夜禁食后稱重,按大鼠總重量比稱取STZ,放一干燥滅菌瓶內,外用錫紙包好,將檸檬酸緩沖液及裝STZ的瓶子置冰浴,一起帶到動物房,如果注射操作技術不熟練,應兩組交替注射,建議分組溶解STZ,比如10只或15只鼠/組。
注射時,推進速度和血糖的關系
      推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相對的危險性較低,但也不容易成模,常規操作中多要求快速注射。當然,STZ的劑量是決定血糖高低的主要因素。
死鼠問題的解決
      鼠的個體差別和空腹(低血糖)抵抗力的差異而致死亡率的不同,開始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不適應,或發生了DKA(即酮癥酸中毒)。
      首先,一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導致死鼠);
      其次,高血糖和低血糖都會造成死鼠,避免死鼠可以通過注射胰島素或暫時補糖,兩種途徑: 1、常見為血糖過高。補胰島素法,補一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素),每次2--3個單位,過了3-5天,大鼠一般死亡率就低了;2、補糖法,禁食后的鼠,注射的時候已經處于低血糖狀態,造模4小時后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射時血糖過低死鼠;
再次,防止動物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下,會互相撕殺、啃食同類,所以食物和飲水要供應充足,最好是兩路供應;
最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,墊料潮濕,需要勤換墊料,所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現感染,特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血測血糖后可用四環素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預防感染。
模型不達標者,三天后補注STZ(以10mg-20mg體重劑量腹腔注射),也很容易成模,或讓血糖恢復正常后再常規劑量注射;但要達到理想的效果,往往是恢復到正常狀態下重新造模。
STZ的保存方法
      ?20°C,干燥避光保存。(注:本品易潮解,如需反復取量過程中,應避免接觸其受水受潮,受潮后30分鐘后失效,這和注射時要求其快速注射是一個道理,即其水溶液不穩定)。
多次稱取STZ時的操作方法和注意事項
如確實需要多次稱取,要嚴格按照避免受潮的原則操作和存放。
操作方法
操作環境、盛裝容器、分裝工具都必須保證干燥。無需冰浴,分裝后用封口膜密封瓶口,用鋁箔紙(或錫箔,即避光)將瓶子包好,放入干燥罐里(干燥劑,即保持干燥狀態), 并-20℃冷藏,可長期保存。本品保質期為2年半。
上海寶曼生物科技有限公司
各部門聯系方式如下↓
企業Q Q:390736915
微信公眾號:Baomanbio

銷售電話:021-62130998
外貿電話:021-62130995
投訴電話:021-60543085
物流電話:021-51853547
采購電話:021-51853546
傳真電話:021-61310835
 
請關注微信公眾號
baomanbio
點擊這里給我發消息
主站蜘蛛池模板: 国产精品18 | 国农村精品国产自线拍 | 亚洲日韩福利在线 | 高清在线精品一 | 区二区动态图 | 成人精品一区二区三区在线 | 国产v片在线播放 | 国产精品va尤物在线观看 | 国产高清精品一 | 亚洲性人人天天夜夜摸 | 亚洲综合 | 久精品国产欧美亚洲色a大片 | 最新好剧电影在线观影平台 | 在线观看男人的 | 国产又粗又硬又大爽黄老大爷视 | 中文字幕亚洲激情 | 真实国产乱子伦对白在线 | 精品国产乱子伦一区二区三区 | 亚洲成a人v影院 | 性色xxxxhd天美传媒 | 日韩v片在线 | 一本精品一区二区在线观看 | 国产99视频精品免费视 | 欧美、另类亚洲日本一区二区 | 尤物网红麻酥酥 | 国产亚洲精品mv第十页 | 亚洲欧洲自拍偷线高清一区二区 | 中文有码vs| 亚洲视频高清不卡在线观看 | 精品日韩嗷嗷视频在线观看 | 乱码视频午夜间在线观看 | 亚洲欧美国产人成在 | 天天搞夜夜 | 电影在线观看 | 美女视频黄 | 精品中文 | 国产自拍偷拍在线一区二区 | 在线成人免费观看国产精品 | 亚洲春色在线视频 | 国产精品香蕉在线的人尹人 | 美女视频黄a视频全免费网站二区 |